关于"全栈NGS"员工的讨论和思考

昨天吃饭时候和实验室人闲聊,扯到一个问题,就是 有没可能一个人把NGS(RNA-seq/DNA-seq/ChIP-seq)从做实验到分析数据,再到写文章一个人全干了呢?

当时是没想太多,但是越想越觉得这个问题其实是很现实的问题,牵扯的是在一个传统生物实验室中,实验和生信两拨人怎么合作,怎么判断贡献的问题。

由于我也算是实验转生信的,对两部分的认识应该是偏颇比较少的。

简单的列一下实验和生物信息需要的技能知识如下:

实验部分

按照步骤顺序应该是:

1. 核酸提取。

  • 对于RNA和DNA的测序来说,这部分实在简单不止一晒,分子生物学入门实验。当然,依然需要牢记分子生物第二常识:“Protocol几乎总是对的,但是它不会强调它在什么情况下是对的”。 这里面坑也很多,比如某些文库需要的长链DNA怎么回收比较好之类的细节,需要领域专门知识才能解决。
  • ChIP-seq会麻烦一点,它要求你至少能做ChIP(染色质免疫沉淀),并且会做像样的质控 (阳性对照阴性对照都跑好了才敢上机啊)。可以算是有一个小门槛。

2. 文库的制备

  • 首先这些东西全都得按kit来,所以其实最需要的是阅读说明书的能力。
  • DNA文库没有反转录, Illumina的Trueseq、Nextera用的很多,NEB、罗氏、kapa之类的也能用,大同小异。
  • RNA文库可能多出一步反转录, 还有一步是mRNA的富集或者是rRNA的去除 ...
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